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Seplife®6FF

Description du produit

Résine de chromatographie agarose à débit rapide

Seplife 6FF

Profil de produit:
Seplife® 6FFrésine de chromatographie agarose à débit rapideest formé par réticulation sur Seplife® 6Bmilieux de chromatographie d'agarose. Sa stabilité chimique et ses propriétés physiques sont considérablement améliorées avec des débits élevés, une charge élevée et une faible adsorption spécifique. Il a un taux de récupération élevé et peut être réutilisé plusieurs fois. Il peut être utilisé pourchromatographie par filtration sur geletpurification des protéines,acides nucléiquesetpeptidesen aval deproduits biopharmaceutiques et bio-ingénierie.

20200804083702

Paramètres de résine:

Code résine Seplife® 6FF
Apparence Perles sphères blanches
Taille des particules (μm) 45 ~ 165
Matrice 6% d'agarose réticulé
Débit (cm / h) <300
Pression (MPa) 0.2
stabilité du pH 2 ~ 12 (long terme), 2 ~ 14 (court terme, CIP)
Application Protéines, acides nucléiques et peptides en aval de
produits biopharmaceutiques et bio-ingénierie
Stabilité chimique Stable dans une solution tampon d'eau: NaOH 2M; 70% d'éthanol, 30%
isopropanol, 30% acétonitrile, 1% SDS, guanidine 6M
chlorhydrate, urée 8M.
Limite d'exclusion 10000 ~ 4 × 106 globuline
Conditions d'essai: Colonne de chromatographie 16 mm * 300 mm; Hauteur du lit à colonnes 15 cm; température 25 ℃;
la phase mobile était de 0,1 mol / L de NaCl.


Instruction de test:
1. emballage de colonne
L'emballage est effectué conformément aux procédures d'exploitation standard. Il faut s'assurer que chaque matériau est à la température de fonctionnement et que le gel doit être dégazé avant d'être emballé.
2. équilibre
Équilibrez la colonne avec 2 à 5 volumes de colonne de la balance de chargement, en vous assurant que la conductivité et le pH de l'effluent sont exactement les mêmes que la conductivité et le pH du tampon de chargement.
3. chargement de l'échantillon
(1) L'échantillon est préparé avec un tampon, et l'échantillon trouble est centrifugé et filtré pour le chargement. Les échantillons avec une teneur excessive en sel et une concentration trop faible doivent d'abord être traités, puis chargés.
(2) La séparation des composants de l'échantillon par le milieu est effectuée en fonction du poids moléculaire des composants, et le poids moléculaire est d'abord évacué.
(3) Le volume de chargement est d'environ 1 à 2% du volume de la colonne et plus les performances de séparation sont faibles.
4. élution
L'élution a été réalisée avec du tampon, et le débit et la composition du tampon ont été maintenus constants pendant l'élution.
5. régénération
Il est généralement lavé avec un tampon pour équilibrer et peut être réutilisé. Certaines protéines ou lipides inactivés ne peuvent pas être lavés pendant la régénération et peuvent être éliminés par nettoyage en place (CIP).
6.CIP
(1) Pour une protéine liée aux ions, elle peut être éliminée avec 0,5 à 1 volume de lit de colonne de 2 M. NaCl.
(2) Pour les protéines précipitées, les protéines liées de manière hydrophobe ou les lipides, il peut être éliminé avec 1 volume de lit de colonne de 0,1 M. NaOH. (3) Pour les protéines, lipides, etc. fortement liés de manière hydrophobe, il peut être lavé avec 4 à 10 volumes de colonne d'éthanol à 70% ou d'isopropanol à 30%. Cependant, il convient de noter que la concentration du solvant organique est progressivement augmentée de manière progressive, sinon des bulles sont facilement générées.
Une fois le nettoyage terminé, équilibrez la colonne avec au moins 3 volumes de lit de tampon d'équilibrage jusqu'à ce que le pH et la conductance restent inchangés.
7. stockage
Scellé et stocké à 4 ~ 30 ℃ (20% d'éthanol dans la solution de stockage), sec, ventilé, propre, non congelé; les colonnes utilisées sont stockées dans une solution d'éthanol à 4 ℃ à 20%.


Mise en garde:
(1) Le volume d'échantillon doit être concentré autant que possible avant d'utiliser la filtration sur gel.
(2) L'échantillon doit être clarifié sans particules.
(3) Afin d'obtenir la résolution la plus élevée, le volume de chargement ne peut excéder 5% du volume du lit.
(4) La chromatographie sur colonne doit être effectuée après l'échantillon et le milieu chromatographique doit être parfaitement équilibré avec le tampon d'élution.
(5) Le lit de la colonne doit être plat, exempt de rainures et de bulles d'air, sinon il doit être remonté.
(6) Afin de protéger la stabilité et l'activité de la protéine, une protéine de purification tampon est sélectionnée.
(7) Afin d'éviter une interaction ionique non spécifique entre la protéine et le milieu, jusqu'à 0,15 mol / L de NaCl peuvent être ajoutés au tampon.
(8) En fonction du poids moléculaire de la protéine cible, le milieu le plus proche de la plage de séparation médiane est sélectionné.
(9) Le débit doit être strictement contrôlé pendant le processus d'élution et pas trop rapide.
(10) Pendant le chargement et tout le processus d'élution, la surface du cylindre ne peut pas sécher.
(11) Ce produit doit éviter tout contact avec des agents oxydants et éviter une exposition prolongée à l'air.



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